badrilla免疫測定校準技術簡述

Badrilla 開發了一種用於(yu) 免疫測定校準的專(zhuan) 有技術，可將常見的免疫測定平台（蛋白質印跡）升級為(wei) 強大的定量平台。定量免疫測定可用於(yu) 有限數量的應用（某些 ELISA 測定），但大多數免疫測定形式（蛋白質印跡、免疫顯微鏡）中不存在定量免疫測定。研究人員希望盡可能以絕對化學單位準確、可重複地測量生物標誌物。為(wei) 了實現這一目標，Badrila 創建了一種專(zhuan) 有的校準標準技術，將蛋白質印跡升級為(wei) 定量免疫測定，能夠檢測絕對化學單位（pmol/樣本或類似單位）的生物標誌物濃度。這為(wei) 快速開發感興(xing) 趣的生物標誌物的簡單定量測定提供了一條途徑。

這項技術是如何運作的？

高質量校準標準品將特定免疫測定的表位特征整合到重組產(chan) 品中，或者通過共價(jia) 連接到支架上確定的反應位點（本身是重組蛋白：b），或者通過製造為(wei) 支架本身的延伸a）。這些製造方法允許根據需要摻入各種複雜的表位，從(cong) 簡單的肽和磷酸肽到蛋白質結構域。

可以快速生成所研究的生物標誌物校準標準。此類校準標準可以以允許構建校準曲線的濃度範圍並入測定中。這可用於(yu) 高精度地確定生物標誌物的絕對濃度。

在測試係統中，對 His6 表位校準標準品進行了兩(liang) 次蛋白質印跡分析。觀察到 55kDa 的單條帶，信號強度隨校準物上樣量的變化而變化 (4pmol – 0.125pmol)。

原始數據的密度測定允許構建校準曲線，該校準曲線可以通過以高的精度一式三份檢查的三種校準物濃度輕鬆定義(yi) 。使用校準曲線可以計算並行檢查的生物標誌物的濃度。觀察到的濃度和絕對濃度的變化小於(yu) 10%。

哪些生物標誌物可以校準？

· 線性肽表位

· 翻譯後修飾位點（磷酸化、糖化等）

· 半抗原（染料、藥物、代謝物）

· 蛋白質結構域

· 單個(ge) 或多個(ge) 表位，以及

· 上述的組合

通過協作發展

Badrilla 與(yu) 利茲(zi) 大學、利物浦大學和牛津大學的傑出學術團體(ti) 合作開展了一項研發計劃。我們(men) 富有成效的協作方法使我們(men) 能夠：

· 采用定量質譜法的基準定量蛋白質印跡技術

· 將定量蛋白質印跡與(yu) 高通量蛋白質印跡相結合，以實現更高的分析通量

· 探索新穎的製造技術（用於(yu) 校準標準）以擴展該技術的多功能性。