儲(chu) 存
凍幹肽應儲(chu) 存在陰涼、避光、幹燥的地方。為(wei) 了獲得最佳保存效果,請將肽儲(chu) 存在 -20°C 或更低的溫度下,並遠離強光。大多數在此溫度下儲(chu) 存的肽將保持穩定數年。
吸收水分會(hui) 大大降低肽的穩定性,並可能降低總肽含量。含有肽的小瓶在打開之前應先升溫至室溫。這將減少固體(ti) 肽的冷表麵或容器內(nei) 部從(cong) 空氣中吸收水分。取出所需數量後,應盡快重新密封小瓶,最好在幹燥氮氣氣氛下,然後將其放回冷藏室。
溶液中含有 Met、Cys 或 Trp 殘基的肽的保質期因氧化而受到限製。為(wei) 了避免重複凍融循環,建議將儲(chu) 備溶液分成等份。如果絕對無法避免在溶液中儲(chu) 存肽,請使用 pH 5-6 的無菌緩衝(chong) 液,並在 -20°C 下儲(chu) 存等分試樣,以延長溶液中肽的儲(chu) 存期限。溶解度肽的溶解度取決(jue) 於(yu) 序列。溶解肽可能很困難,特別是當肽非常疏水時。一般來說,嚐試將肽溶解在無菌蒸餾水中。如果肽仍然不溶,請嚐試以下步驟:
超聲處理可能會(hui) 有所幫助,因為(wei) 它可以提高溶解速度。
堿性肽添加10%乙酸或0.1% TFA;對於(yu) 酸性肽,使用 1% 氫氧化銨或 10% 碳酸氫銨進一步超聲處理可提高溶解度。
對於(yu) 仍然不溶的肽,添加有機溶劑,例如乙腈、DMSO 或 DMF,濃度高達 20% (v/v)。請注意,這些溶劑可能會(hui) 幹擾某些生物測定。對於(yu) 具有二級結構的肽,可能需要添加離液劑,例如尿素或鹽酸胍。