genovis產品介紹—IgA1 特異性蛋白酶

IgASAP Sub1 是一種 IgA1 特異性蛋白酶，可在鉸鏈上方的一個(ge) 特定位點消化人類 IgA1，產(chan) 生完整且同質的 Fab 和 Fc 片段。

該酶能夠生成完整的單價(jia) Fab 片段以及 IgA1 的中水平分析，從(cong) 而有助於(yu) 在疫苗、治療和診斷等開發過程中進行 IgA1 表征。

• 實現IgA1 的中層表征和質量控製

• 快速– 在 1 小時內(nei) 生成均質的 Fab 和 Fc 片段

• 高度特異性– 人類 IgA1 鉸鏈上方有一個(ge) 消化位點

人類 IgA1 的位點特異性消化

為(wei) 了證明 IgASAP Sub1 的位點特異性，將市售的人骨髓瘤 IgA1 用凍幹的 IgASAP Sub1 在 37°C 下消化 1 小時，並與(yu) 未消化的 IgA1 進行比較。由於(yu) IgA1 攜帶多個(ge) N- 和 O- 聚糖，因此使用 OmniGLYZOR 試劑盒處理樣品，包括在變性條件下使用 PNGaseF 凍幹進行額外的去糖基化步驟，以去除所有 N-聚糖，以方便數據解釋。
使用 IgASAP Sub1 的消化快速、簡單，並且在生理條件下進行，酶的特異性可防止 IgA1 的過度消化。盡管起始材料不同，但數據清楚地顯示了人 IgA1 上鉸鏈區 (VPSTPP / TPSPST) 的單個(ge) 消化位點，並強調了使用中級工作流程為(wei) 此類複雜樣品生成高分辨率質量數據的優(you) 勢。

圖 1. IgA1 的位點特異性消化。 a)工作流程示意圖。來自人骨髓瘤的市售 IgA1的 N-和 O-去糖基化b)重鏈 (HC) 以及 N-和 O-去糖基化c) scFc 片段和d) 的解卷積質譜使用 IgASAP Sub1 在 37°C 消化 1 小時後的 Fd 片段。 HC 和 scFc 片段的異質性源自多個(ge) C 末端截斷和剩餘(yu) 的延伸 O-聚糖，未被 OmniGLYZOR 去除。通過反相色譜（ACQUITY Premier Protein BEH C4，300 Å，1.7 µm 2.1 x 100 mm，Waters™）分離樣品，並使用 ESI-QTOF MS（Bruker Impact II）進行分析。

IgASAP ™ Sub1 凍幹   貨號：I0-IA1-010

用於(yu) IgA1 以上鉸鏈消化的凍幹酶。

IgASAP Sub1 凍幹劑以凍幹粉末形式提供，裝在 1000 單位小瓶中，用於(yu) 消化 1 mg IgA1。

• 方法開發的靈活格式

• 可以組合酶以提高效率

• 適合自動化工作流程

• 即可使用——隻需加水即可！