抗酸杆菌染色方案

分枝杆菌細胞壁含有由分枝菌酸組成的蠟狀物質。這些是鏈長最多 90 個(ge) 碳原子的 ß-羥基羧酸。耐酸牢度的特性與(yu) 任何特定物種中發現的分枝菌酸的碳鏈長度有關(guan) （Lyon H 1991）。

堿性品紅與(yu) 細菌中帶負電的基團結合。分枝菌酸（和其他細胞壁脂質）對染料進入和洗脫（用溶劑洗掉）構成障礙，通過在堿性品紅濃水溶液中添加親(qin) 脂劑和部分加熱可以部分克服這一障礙。

技術要點： 包括一個(ge) 控件

方法

1. 將工作溶液放入科普林罐中，並在 58 -60 ℃水浴中預熱10 分鍾。

2. 將切片脫蠟，放入水中。

3. 在水浴中預熱的工作溶液中染色 15 分鍾。

4. 將裝有載玻片的 COPLIN JAR放入流動的冷自來水中 2 分鍾。

5. 從(cong) 科普林罐中取出載玻片並用流水清洗 1 分鍾。

6. 在酸性酒精中進行分化，直到載玻片上不再有顏色流出。

7. 用水短暫清洗以除去酸性酒精

8. 用亞(ya) 甲藍複染 15 至 30 秒。

9. 水洗、脫水、澄清並封固在 DPX 中。

結果

• 抗酸杆菌................................................紅色

• 細胞核................................................藍色

• 其他組織成分................................藍色

試劑配方

1、染色液：

庫存溶液 A（穩定 6 個(ge) 月）

                        LOC 高泡沫（安利）....... 0.6 毫升

                        蒸餾水............................ 100 毫升

            庫存溶液B       

                        堿性品紅...................................... 1克

                        無水乙醇...................... 10 毫升

            這兩(liang) 種溶液可以作為(wei) 儲(chu) 備溶液保存並在使用前混合。

2. 工作液（穩定1個(ge) 月）

                    將 50ml A 與(yu) 5ml B 混合。

3.酸性醇——3%鹽酸溶於(yu) 95%乙醇

                        無水乙醇......................... 95ml

                        蒸餾水......................2毫升

                        濃鹽酸...3毫升

            配製酒精溶液，然後加入濃酸。當

            處理濃酸。

4. 1%乙酸中的0.25%亞(ya) 甲藍

亞(ya) 甲基藍........................0.25克

蒸餾水................................99毫升

乙酸...................................... 1 毫升