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如何提取遊離DNA?

更新時間:2023-12-18      點擊次數:667

cfDNA 的分離、定量和評估並不是一項簡單的任務。它需要敏感且可靠的工作流程。

cfDNA 是一種極其難以處理的樣品類型,因為(wei) cfDNA 的產(chan) 量通常有限且高度碎片化。這就是 MagVigen™ cfDNA 提取試劑盒(貨號 #K61003)發揮作用的地方。它可以為(wei) NGS 檢測提供更高產(chan) 量和更高質量的 cfDNA 樣本(相對於(yu) Qiagen 試劑盒)。




cfDNA 提取工作流程

  1. 1.溶解溶解等離子體(ti) 樣品。


  2. 2.結合和捕獲:將 MagVigen™ 納米顆粒與(yu) 樣品混合。納米顆粒與(yu) cfDNA 片段結合。


  3. 3.沉澱和重新分散 1:磁性沉澱珠子直至溶液澄清。珠子響應磁力(通過使用磁鐵,例如磁力分離架),使結合的材料能夠快速有效地與(yu) 樣品的其餘(yu) 部分分離。通過抽吸除去上清液(未結合的材料),剩下的是納米顆粒結合的目標。然後將珠粒重新分散在洗滌 1 緩衝(chong) 液中。


  4. 4.轉移:將洗滌 1 溶液轉移至 1.5 或 2ml 管中。


  5. 5.沉澱和重新分散 2:磁力沉澱,按照步驟 3 去除上清液。這次將珠粒重新分散在 75% 乙醇中。


  6. 6.清洗和沉澱 2,3:使用 75% 乙醇清洗珠粒。將珠子沉澱並除去所有上清液。將珠粒重新分散在 75% 乙醇中。執行此步驟兩(liang) 次。


  7. 7.洗脫:高質量 cfDNA 的最終洗脫。為(wei) 下遊 NGS、PCR 或其他應用做好準備。
    2次洗脫有助於(yu) 提高cfDNA產(chan) 量。


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