快速色譜法是純化反應混合物和天然產(chan) 物提取物的重要工具。現代快速色譜儀(yi) 器配備了紫外檢測器來觀察洗脫的化合物並觸發其收集。然而,用於(yu) 分離各種混合物成分的溶劑有時會(hui) 掩蓋或降低其可檢測性,從(cong) 而降低其純度和回收率。
那麽(me) ,你可以做些什麽(me) 來緩解這個(ge) 問題呢?
那麽(me) ,您可以嚐試一些選擇,包括更換溶劑(例如,將乙酸乙酯改為(wei) 丙酮或 MTBE)或使用能夠實時消除溶劑紫外線吸收(又稱基線校正)的閃蒸係統。兩(liang) 者都有各自的優(you) 點,但本文重點討論基線校正。
Biotage® Selekt 等 Flash 係統提供實時基線校正。該功能消除了運行過程中溶劑造成的任何紫外線吸收,從(cong) 而使紫外線吸收溶劑無法檢測到的化合物變得對檢測器可見。
例如,靛紅酸酐和苄胺的反應產(chan) 生了所需的產(chan) 物和一些副產(chan) 物。使用 5 克矽膠柱 (Biotage® Sfär HC) 和庚烷/乙酸乙酯梯度進行快速色譜法僅(jin) 檢測產(chan) 品,因為(wei) 基線隨著乙酸乙酯梯度的增加而上升,圖 1。
圖 1.使用庚烷/乙酸乙酯梯度純化反應混合物,並使用 UV 檢測,無需基線校正,隱藏了粗反應混合物中的副產(chan) 物。
為(wei) 了可視化反應中產(chan) 生的副產(chan) 物,啟用係統基線校正功能(通常是默認方法參數)的純化消除了這個(ge) 問題,圖 2。
圖 2.啟用基線校正的反應混合物純化揭示了隱藏的副產(chan) 物。
因此,如果紫外線基線上升導致您出現檢測問題,請考慮具有基線校正功能的閃光係統。