一、鄰位連接適用的最短和最長距離是多少?
所有的Duolink® PLA產(chan) 品都是被設計用於(yu) 鄰位檢測的。當使用二抗方法時,理論上在兩(liang) 種靶標蛋白(表位)間產(chan) 生信號的最長距離為(wei) 40 nm。這些數據是基於(yu) 抗體(ti) 的平均直徑約為(wei) 10 nm而計算出來的。Duolink® PLA理論上可檢測距離在0 nm之內(nei) 的兩(liang) 個(ge) 表位,隻要兩(liang) 種單抗可發生結合並且不存在位阻。
二、Duolink® PLA產(chan) 品或試劑可持續多久?
1.檢測試劑盒中的所有試劑必須總是被保存在-20 °C。這一點對於(yu) 連接酶和聚合酶尤為(wei) 重要,它們(men) 如果被拿出冰箱後需要被保存在預冷的冷凍模塊中(冷凍模塊可保持酶處在-20 °C;而冰浴並不能實現這一點)。Duolink® PLA探針、抗體(ti) 稀釋液、封閉液以及封片液必須被保存在+4 °C。不要將PLA探針或由Probemaker生成的探針進行冷凍。
2.隻要保存在-20 °C,我們(men) 可在您收到Duolink® PLA Probemaker後提供6個(ge) 月的保障。一旦發生偶聯後,我們(men) 的經驗是絕大多數抗體(ti) 在+4 °C的有效期為(wei) 三至六個(ge) 月。這種情況下,它將非常依賴於(yu) 抗體(ti) 是否需要特殊的保護劑。
三、是否可以將Duolink® PLA用於(yu) 活細胞或非固定的組織樣品?
1.Duolink® PLA一直是針對固定細胞和組織而優(you) 化的。
2.通透化對於(yu) 抗體(ti) 和探針找尋到其靶標是必需的。
3.此外,一些Duolink® PLA試劑(酶、DNA寡核苷酸)可能會(hui) 被活細胞中活性機製所摧毀。
四、是否可以將PLA探針與(yu) 傳(chuan) 統的免疫熒光結合使用?
是的。 隻要所有的抗體(ti) 來自不同的物種並且熒光檢測係統使用的是不同顏色的熒光,就可以將Duolink® PLA探針與(yu) 傳(chuan) 統的免疫熒光技術結合使用。