Duolink® PLA流式蛋白檢測試劑盒的介紹

傳(chuan) 統流式細胞術在蛋白質互作和低豐(feng) 度蛋白檢測方麵能力受限。我們(men) 將流式細胞術與(yu) Duolink®鄰位連接技術（PLA）結合在一起，實現了蛋白互作流式分析。Duolink® flowPLA檢測試劑盒通過增強靈敏度可以檢測細胞群中的低豐(feng) 度靶蛋白。該實驗方案易於(yu) 操作，可適配任意流式細胞儀(yi) 來提供可直接發表的實驗結果。

Duolink® flowPLA檢測試劑盒可進行40次反應，每次需100,000細胞溶於(yu) 100 µL反應液中。試劑盒組分包含：

1.連接原液(5X) – 稀釋配製1X連接緩衝(chong) 液

2.連接酶(1 U/μL) – 添加配製連接液

3.擴增原液(5X) – 稀釋配製1X擴增緩衝(chong) 液

4.聚合酶(10 U/μL) – 添加配製擴增液

5.檢測原液(5X) – 稀釋配製1X檢測緩衝(chong) 液

Duolink®鄰位連接檢測（PLA）實現了對內(nei) 源性蛋白質-蛋白質相互作用（PPI）和翻譯後修飾的研究，為(wei) 單一事件提供了可通過顯微鏡或流式細胞儀(yi) 進行可視化的熒光信號。為(wei) 了實現對蛋白質間相互作用的研究，Duolink® PLA技術使用了一對帶有寡核苷酸標記的抗體(ti) ，當它們(men) 相距在40nm以內(nei) 時，可進行滾圈擴增並在添加標記探針後產(chan) 生特異性熒光信號。

Duolink® PLA可提供四種不同顏色的熒光用於(yu) 流式細胞儀(yi) 和顯微鏡檢測，對細胞中多組蛋白質間的相互作用實現可視化。借助Duolink® PLA技術的放大能力和諸多優(you) 勢，發現任何科研突破機會(hui) ：

1.可視化蛋白互作——包括穩定和瞬時兩(liang) 種

2.可視化翻譯後修飾

3.檢測內(nei) 源蛋白——無需表達或遺傳(chuan) 操作

4.高特異性——使用兩(liang) 種抗體(ti) /探針消除假陽性

5.無需特殊設備——可提供基於(yu) 標準免疫熒光和流式細胞術的方法