提取 DNA 後,大多數實驗的下一階段需要已知濃度作為(wei) 輸入材料。測量DNA濃度的方法有很多,如紫外吸收法、熒光染料法、電泳法等。
DNA 分光光度計通常用於(yu) 測量濃度,本文將概述它們(men) 的工作原理以及使用原因。
分光光度法是一種重要的方法,用於(yu) 一係列生化實驗,包括 DNA、RNA 和蛋白質定量和質量控製。在這些應用中,通常僅(jin) 提供少量樣品,並且優(you) 選進行無損分析。使用微體(ti) 積分光光度計(有時稱為(wei) 納體(ti) 積分光光度計或納滴分光光度計)可最大限度地減少定量樣品的使用,通常僅(jin) 需要 1 µL 樣品。
分光光度法是電磁光譜法的一種形式,涉及材料的透射或反射特性隨波長的變化的定量測量。DNA 分光光度計使用檢測器記錄一定波長範圍內(nei) 的光束強度。
DNA 分光光度計經常用於(yu) 檢測紫外線、紅外線和可見光輻射,但它們(men) 也可以檢測電磁波譜的許多其他元素。波長範圍(可以透過測試樣本的顏色)是 DNA 光譜儀(yi) 的一個(ge) 重要特征。此外,樣品透射率百分比、樣品吸收率的對數範圍以及有時反射率測量的百分比對於(yu) 某些應用來說是重要的特征。
在溶液中,DNA 分光光度計可以測量堿基吸收的紫外線水平。DNA 和其他核酸吸收峰值波長為(wei) 260nm 的光。吸收的光量與(yu) 樣品中 DNA 的濃度成正比。使用比爾-朗伯方程根據透射光量計算濃度。要使用分光光度計定量 DNA,應將 DNA 懸浮在溶劑中,並用溶劑對分光光度計進行空白以校正任何背景吸光度。
分光光度計是極其精確、準確和複雜的設備,可以用作實驗室的台式或模型,也可以便攜式用於(yu) 現場工作。
DeNovix 的 DS-11 係列在分光光度測定領域提供了革命性的性能。它結構緊湊且易於(yu) 使用,能夠提供具有熒光功能的全光譜紫外-可見分析,這意味著它非常適合快速核酸和蛋白質定量。