RNA 定量的最佳技術介紹

RNA 和 DNA 定量（有時稱為(wei) 核酸定量）可確定給定樣品中 RNA 或 DNA 的濃度。定量過程的一部分可能涉及處理混合物樣品，可能含有多種汙染物，例如蛋白質、其他核酸或有機化合物。

什麽是RNA定量？

有多種實驗方法可用於(yu) RNA 定量。其中包括用於(yu) RNA 定量、熒光或分光光度測量的 PCR 方法。 

用於(yu) RNA 定量的分光光度法和熒光法比 PCR 等方法具有多個(ge) 優(you) 勢。使用光學方法進行 RNA 定量不需要任何額外的樣品製備，非常經濟高效且耗時較少。雖然基於(yu) PCR 的方法可以提供良好的靈敏度，但它們(men) 更複雜且執行成本更高，並且隻有極低 RNA 濃度的 RNA 定量才需要這種水平的靈敏度。 

分光光度法和熒光分析

分光光度測量提供了一種穩健且直接的 RNA 定量方法。RNA 定量通常在 260 nm 下進行，同時還會(hui) 收集 UV 範圍內(nei) 的一係列波長。大多數蛋白質、小有機分子和核酸在該區域具有很強的吸收和發射特征，從(cong) 而可以對 RNA 進行定量並識別潛在汙染物。

在已知光程下測量的樣品吸光度與(yu) 該樣品的濃度成正比。在特定波長（RNA 為(wei) 260 nm）下透過樣品的光量可用於(yu) Beer-Lambert 方程來計算感興(xing) 趣樣品的濃度，在本例中用於(yu) RNA 定量。還必須知道感興(xing) 趣物種的摩爾吸收係數。

計算摩爾吸收係數相對簡單。由於(yu) 給定波長下的吸光度和光程之間的關(guan) 係與(yu) 濃度成線性比例，因此可以測量參考樣品的一係列給定稀釋度。通過對這些數據點進行線性擬合，可以計算摩爾吸收係數並用於(yu) 將來的量化。對於(yu) DNA 和 RNA 等充分表征的樣品，係數是已知的並包含在分析軟件中。 

RNA 定量也可以通過熒光測量來進行。熒光測量比基於(yu) 吸光度的測量具有更高的靈敏度。已經開發出專(zhuan) 為(wei) 激發感興(xing) 趣的分析物而開發的檢測試劑盒。即使在複雜混合物或存在汙染物的情況下，這些也可用於(yu) RNA 定量。樣品的熒光量也與(yu) 濃度成正比，並且可以通過使用已知濃度的類似樣品的標準曲線來定量。 

用於 RNA 定量的分光光度計

DeNovix 是生物技術專(zhuan) 家，擁有多種針對 RNA 定量進行優(you) 化的儀(yi) 器，包括 DS-11 係列和 QFX 熒光計，這些儀(yi) 器在設計時考慮了 RNA 定量的一些複雜性。

QFX 熒光計具有出色的靈敏度和特異性，適用於(yu) 可能涉及高度複雜的混合物或需要在極低濃度下進行 RNA 定量的挑戰性 RNA 定量情況。它配備了四個(ge) 光源和帶有敏感光電二極管的發射通道，所有這些都可以選擇用於(yu) 藥理學應用的安全審計跟蹤記錄。 

DS -11 係列是一款適用於(yu) 常規樣品和珍貴樣品的微量儀(yi) 器。DS-11 可以處理小至一微升的體(ti) 積，並在最寬的可用動態範圍內(nei) 進行定量。DS-11 還配備了易於(yu) 使用的軟件，可以顯示全光譜掃描以及通常用作 RNA 定量和質量控製一部分的 260/280 和 260/230 比率。