Pierce™ BCA 蛋白質檢測試劑盒簡述

提供的試劑盒選項包括 Pierce 免稀釋 BSA 蛋白質標準品，這是一組七個(ge) 預稀釋的 BSA 標準品，包裝在多通道移液器友好的試管中。試管條包括一個(ge) 空管，使用戶能夠添加自己的樣品緩衝(chong) 液以進行空白扣除。

BCA 蛋白質檢測試劑盒的特點包括：
• 比色法— 目視估計或使用標準分光光度計或酶標儀(yi) 在 562 nm 處進行測量
• 準確— 顯示通過染料結合方法 (Bradford) 觀察到的蛋白質間變異的一半
• 兼容—不受大多數離子型和非離子型去汙劑典型濃度的影響
• 測定時間短— 孵育30分鍾；比傳(chuan) 統的 Lowry 方法更簡單，速度快四倍
• 檢測範圍寬 — BSA 的線性工作範圍為(wei) 20 至 2000 µg/mL
• 靈敏— 使用增強協議檢測低至 5 µg/mL
•不再需要連續稀釋— 套件選項包括稀釋- 免費 BSA 蛋白質標準品，無需在生成標準曲線時進行連續稀釋 測定原理 BCA 蛋白質

測定
結合在堿性介質中通過蛋白質將Cu 2+還原 為(wei) Cu 1+的特性與(yu) 高靈敏度以及亞(ya) 銅陽離子 (Cu 1+）由二辛可寧酸（BCA）製成。第一步是銅與(yu) 蛋白質在堿性環境中螯合，形成淺藍色複合物。在這種稱為(wei) 縮二脲反應的反應中，含有三個(ge) 或更多氨基酸殘基的肽在含有酒石酸鈉鉀的堿性環境中與(yu) 銅離子形成有色螯合物。

在顯色反應的第二步中，BCA 與(yu) 第一步中形成的還原（亞(ya) 銅）陽離子發生反應。兩(liang) 個(ge) BCA 分子與(yu) 一個(ge) 亞(ya) 銅離子螯合產(chan) 生深紫色反應產(chan) 物。 BCA/銅複合物是水溶性的，並且隨著蛋白質濃度的增加，在 562 nm 處表現出很強的線性吸光度。該複合物的靈敏度（檢測下限）比第一個(ge) 反應的淡藍色靈敏約 100 倍。

該反應受到蛋白質氨基酸序列中四個(ge) 氨基酸殘基（半胱氨酸、胱氨酸、酪氨酸和色氨酸）的強烈影響。然而，與(yu) 考馬斯染料結合方法（即 Bradford）不同，通用肽主鏈也有助於(yu) 顏色形成，有助於(yu) 最大限度地減少蛋白質成分差異引起的變異性。