氨基 PEG 的酰胺偶聯方案

當PH值為(wei) 7-9時，不需要偶聯劑，PEG胺能與(yu) NHS酯有效反應。

(1)將含有小分子的胺緩慢溶解在有機溶劑中，如DMF、CH2Cl2、DMSO、THF或其他溶劑。
(2)根據反應動力學，在連續攪拌下將含NHS的化合物以1:1或2:1當量mmol添加到反應混合物中。
(3)根據底物的性質攪拌反應混合物3-24小時，並通過LC-MS或TLC板監測。
(4)最終產(chan) 物可以通過常規的有機合成或柱純化來分離。

比例1:1當量
偶聯劑可以是EDC、DCC、HATU。 EDC 交聯在酸性 (pH 4.5) 條件下很有效。
(1)開瓶前將EDC和羧酸保持至室溫。
(2) 將 100mg 每種試劑（約 100μL）溶解在所需量的可與(yu) 水混溶的無水溶劑（如 DMF 或 DMSO）中，製備羧酸儲(chu) 備溶液。
(3)將適量的EDC和含胺分子加入適量的活化緩衝(chong) 液中的羧化表麵，並在室溫下反應15分鍾。
(4)加入DTT猝滅EDC。注意：對於(yu) 易於(yu) 清潔的表麵，可以跳過淬火步驟，並用偶聯緩衝(chong) 液清洗表麵，以去除任何殘留的 EDC 和 NHS。
(5)將綴合物緩衝(chong) 液中製備的羧酸混合物添加至活化的表麵並在室溫下反應2小時。
(6) 加入羥胺或另一種含胺緩衝(chong) 液以猝滅反應。羥胺水解固體(ti) 表麵上未反應的 NHS 並形成羥基鹽。其他猝滅方法包括添加三聚氰胺、賴氨酸、甘氨酸或乙醇胺；然而，這些含伯胺的化合物可以修飾羧基。 （注：新引入的羧基可以通過重複步驟4和5進一步修飾）
(7) 將偶聯緩衝(chong) 液中製備的所需含胺底物添加到活化的表麵，並在室溫下反應2小時。
(8) 按照步驟7所述猝滅反應。