OptiVitro® T細胞無血清培養基

✓ 無血清，無異種成分，無外源生長因子
✓ 支持T細胞的快速增殖和高密度培養(yang) ，可用於(yu) 大規模工藝流程
✓ 提供瓶裝&袋裝兩(liang) 種形式，便於(yu) 生產(chan) 規模擴大和商業(ye) 化開發
✓ 適合於(yu) 多種激活方法，可支持較長周期的穩定培養(yang) （＞14天）
✓ 自主研發，供貨穩定，可提供定製化服務（配方優(you) 化等）
✓ 按照GMP標準生產(chan) 和管理， 完成FDA DMF備案

應用：適合用於(yu) 擴增人外周血單個(ge) 核細胞（PBMC）中的 T 細胞，也適合於(yu) T 細胞的重激活擴增培養(yang) 。應用於(yu) T細胞療法開發，如CAR-T、TCR-T、TIL等。

• 常見問題

  1. 組分：
  本產(chan) 品每1L基礎培養(yang) 基配發8mL添加組分，添加組分不是ICSR或者血替，化學成分明確，可放心使用，必須配成全培養(yang) 基後再使用；——可以提供成分說明及TSE/BSE的申明。
  2. T細胞激活方式：
  使用本產(chan) 品，可根據說明書(shu) 用抗體(ti) 包板方式進行激活，也可購買(mai) 商業(ye) 抗體(ti) 偶聯磁珠進行激活，本產(chan) 品同樣支持磁珠激活。
  3. 活率：
  直接培養(yang) PBMC，D5後活率可達90%以上，從(cong) PBMC中分選出T細胞，則D3開始活率可達到90%以上，D7後活率均可達到95%以上；如果轉導CAR，轉導當天活率顯著下降，為(wei) 正常現象，繼續培養(yang) 活率會(hui) 持續上升。
  4. 培養(yang) 方式：
  使用本產(chan) 品，比較推薦的培養(yang) 方式是D0天激活，D3、D5、D7補充培養(yang) 液將細胞密度調整到0.5-1x10^6cells/ml,D7後可選擇2天或3天補一次液。
  5. T細胞擴增速度：
  T細胞的擴增在D3-D9速度較快，基本平穩，D9細胞擴增倍數一般可以達到200倍以上。D9後細胞擴增速度逐漸減緩，激活PBMC中的T細胞，最多可培養(yang) 20天。
  6. 高密度培養(yang) ：
  靜置培養(yang) ，密度可達5-6x10^6 cells/ml，搖瓶培養(yang) 或其他震蕩培養(yang) 方式，密度可達10x10^6 cells/ml以上。
  7. CD4/CD8比例調節：
  使用本產(chan) 品並且用磁珠激活，CD4比例較高，用抗體(ti) 包板激活則CD8比例較高，可以通過改變激活方式、改變抗體(ti) 包板濃度，調節CD4/CD8比例。
  8. T細胞亞(ya) 型分群：
  Tn為(wei) 初始T細胞，Tcm為(wei) 中央記憶型T細胞，Tem為(wei) 激活的Tcm，Tef為(wei) 效應T細胞，分群比例隨著細胞培養(yang) 的時間而變化。不同客戶對分群的要求可能不同，且不同激活方式、細胞因子的選擇以及濃度，對分群影響很大，建議客戶自行測試。
  9. T細胞轉導：
  根據客戶反饋測試數據，本產(chan) 品陽性率可達到50%左右，但是不同客戶使用的工藝不同，可能導致陽性率有變化。CAR慢病毒轉導，可使用polybrene輔助轉導，逆轉錄病毒轉導可使用retronectin輔助轉導，也有許多新型輔助因子可提高轉導效率；采用離心轉導的方式可提高轉導效率。
  10. T細胞生物反應器培養(yang) ：
  靜置培養(yang) 後D5-D7開始在反應器中培養(yang) ，在達到目標體(ti) 積之前，可以2-3天補液細胞密度調整到0.5-1x10^6 cells/ml，到達目標體(ti) 積後可以采取部分灌流策略。