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定量蛋白質印跡介紹

更新時間:2023-08-29      點擊次數:538

什麽是定量蛋白質印跡?

定量蛋白質印跡使不同治療之間的相對比較成為(wei) 可能。定量蛋白質印跡的目標是準確測量蛋白質表達的變化。

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蛋白質印跡用途

  • 蛋白質-蛋白質相互作用

  • 信號通路

  • 翻譯後修飾

  • 細胞表麵蛋白

  • RNAi分析

為什麽我們需要定量蛋白質印跡?

改變生活的療法。農(nong) 作物產(chan) 量增加。我們(men) 所有人都希望通過我們(men) 一生的工作做出改變。定量西部片可以成為(wei) 推進發現並使世界變得更美好的強大工具。

呈現最佳印跡

科學出版商、資助機構以及生物技術和製藥公司對定量蛋白質印跡感興(xing) 趣。近年來,發表蛋白質印跡的期刊標準變得更加嚴(yan) 格。5 , 6 , 7 , 8 , 9 了解西方人的理論和技術對於(yu) 獲得準確的蛋白質定量非常重要。有了更多可信的數據,我們(men) 就能為(wei) 未來奠定堅實的基礎。

定量蛋白質印跡要求

  • 信號與(yu) 加載的蛋白質量成正比。

  • 感興(xing) 趣的蛋白質(或“目標")在檢測的線性範圍內(nei) 進行定量。

  • 內(nei) 部上樣控製可糾正樣品製備、上樣和轉移過程中不可避免的變化。

除了這些要求外,實驗變異性還應保持較低,以便可實現複製。

對於(yu) 定量分析,您必須驗證幾個(ge) 條件。條帶強度的差異可能是由實驗變異性(如使用不同的抗體(ti) 或阻斷劑)或真正的生物學變化引起的。在設計實驗之前,確定蛋白質印跡過程中變異的來源以及如何最好地控製它們(men) 非常重要。

什麽是可變性?

您的結論將始終基於(yu) (並受到)實驗中的變異量的影響。您可以使用 CV(變異係數)、σ(標準差)、r 2(決(jue) 定係數)或其他全方式來定義(yi) 或測量變異性。減少變異性是最大限度提高精度的關(guan) 鍵。

確定實驗結果的重要性是定量西方學者普遍關(guan) 心的問題。一種方法是定義(yi) 已處理和未處理樣本之間頻帶信號的百分比變化。實驗變化需要大於(yu) 您對變異性的測量,例如 CV。因此,為(wei) 了對微小的變化更有信心,請降低實驗中的 CV。說起來容易做起來難,對吧?為(wei) 了始終如一地獲得準確的答案,請盡可能消除錯誤源。



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