iLite ®技術

適用於整個藥物開發過程的多功能工具

iLite技術基於(yu) 報告基因檢測格式，為(wei) 整個(ge) 藥物開發過程以及生物藥物監測的應用提供了無縫解決(jue) 方案。  

該技術幾乎可以針對任何藥物靶標進行開發，並提供一種簡單、快速和準確的測試格式，用於(yu) 測量和量化藥物活性和免疫原性。細胞以 Assay Ready 格式提供，無需細胞培養(yang) ，並允許在部門之間或第三方合作者之間無縫轉移檢測。

通過將歸一化讀數和嵌合轉錄因子等功能與(yu) 高度靈活的產(chan) 品格式相結合，iLite技術可幫助您充分利用生物測定。

工作原理 - iLite ®基於(yu) 細胞的技術原理

iLite基於(yu) 細胞的檢測基於(yu) 簡單的報告基因技術。對特定靶標或配體(ti) 具有特異性的受體(ti) 在細胞表麵表達。一旦配體(ti) 與(yu) 受體(ti) 結合，就會(hui) 觸發細胞內(nei) 信號級聯，從(cong) 而導致啟動子區域與(yu) 報告基因融合，在本例中為(wei) 螢火蟲熒光素酶。 

報告基因的激活以及底物的添加將產(chan) 生光。光量與(yu) 與(yu) 受體(ti) 結合的配體(ti) 的量和活性相關(guan) 。

雙報告基因係統

當配體(ti) 與(yu) 其受體(ti) 結合時，特定的細胞內(nei) 信號傳(chuan) 導途徑被激活，觸發編碼熒光素酶的特定報告基因構建體(ti) 的轉錄。當添加底物時，熒光素酶產(chan) 生光，然後可以使用光度計將熒光素酶的量以及由此配體(ti) 的量和活性測量為(wei) 光發射。

iLite細胞是它們(men) 還包含第二個(ge) 報告基因，該基因受組成型啟動子控製，這意味著它在任何活細胞中連續表達。換句話說，第二個(ge) 報告基因產(chan) 生的光量將與(yu) 活細胞的數量相關(guan) ，因此可用於(yu) 標準化結果以補償(chang) 細胞數量的差異。

ILITE ADCC 技術 - 它是如何工作的？抗體(ti) 依賴性細胞介導的細胞毒性 (ADCC) 是一種免疫反應，其中攜帶 Fc 受體(ti) 的效應細胞識別並殺死表麵表達腫瘤或病原體(ti) 特異性抗原的抗體(ti) 包被的靶細胞。許多基於(yu) 抗體(ti) 的療法至少部分依賴於(yu) 它們(men) 在患者中誘導 ADCC 的能力。 iLite  ADCC 產(chan) 品線提供了一種方便而強大的方法來測量抗體(ti) 在體(ti) 外 引發 ADCC 的功效 。  

基於 Fc 受體、抗體和靶標交聯的發光

當效應細胞與(yu) 與(yu) 其靶細胞結合的藥物抗體(ti) 相互作用時，ADCC 過程就會(hui) 被觸發。效應細胞表麵上的FcγIIIa (CD16a)受體(ti) 與(yu) 抗體(ti) 的Fc區結合，從(cong) 而在效應細胞和靶細胞之間建立橋梁。

在形成該橋之後，工程化的效應細胞將通過細胞  內(nei) 途徑產(chan) 生熒光素酶，並專(zhuan) 門從(cong) 這種交聯和信號傳(chuan) 導中產(chan) 生發光，而不是像在體(ti) 內(nei) 情況下那樣裂解靶細胞。發光的強度與(yu) 藥物誘導 ADCC 的能力相關(guan) 。

與(yu) 抗體(ti) 結合後，效應細胞中的 NFAT、CREB、NfκB、API 和 Jak-STAT 通路被激活。控製螢火蟲熒光素酶基因的啟動子經過巧妙設計，包含所有這些途徑的結合位點。與(yu) 僅(jin) 依賴 NFAT 響應啟動子的市售報告基因相比， 這更接近地反映了體(ti) 內(nei) FcγRIIIA 信號轉導途徑。  

標準化基因可輕鬆進行樣本之間的比較

與(yu) 大多數iLite細胞係一樣，iLite ADCC 效應細胞也具有次級熒光素酶讀數，來自在組成型啟動子控製下表達的熒光素酶基因。這使得能夠根據細胞數量對每個(ge) 單獨的讀數進行標準化，並補償(chang) 潛在的基質效應。    

工程化靶細胞可篩選非特異性激活  

iLite ADCC 係統配備了一套工程同係物 (+) 和 (- )靶細胞，可以精確、特異性地確定 ADCC 活性的差異。它還可以比較針對相同抗原的不同治療抗體(ti) 之間的 ADCC 活性。 

目標 (+) 細胞

靶（+）細胞 已被設計為(wei) 通過內(nei) 源表達的過度激活或通過插入編碼該抗原的基因來過度表達特定抗原。

這使得抗原在細胞表麵上得到穩定且受控的表達。

目標 (-) 細胞

目標 (-) 細胞 基於(yu) 與(yu) 目標 (+) 細胞相同的細胞背景，但不呈現特定的表麵目標分子。因此，效應器和靶細胞之間無法通過抗體(ti) 建立交聯，並且不會(hui) 產(chan) 生螢火蟲熒光素酶的發光。

因此，特異性抗原陰性靶細胞提供了一種檢測和校正有時在人血清樣品中觀察到的非特異性效應的方法。