細胞分選試劑配置涉及到一係列用於細胞分選和分離的試劑和緩衝液,包括常用的試劑和其配製方法。
緩衝液的配製:
磷酸鹽緩衝液(PBS):
配方:137 mM NaCl、2.7 mM KCl、10 mM Na2HPO4、1.8 mM KH2PO4。
將上述化合物按照配方稱取後,加入適量的去離子水溶解,並用鹽酸或氫氧化鈉調節 pH 值至7.4,最後用去離子水定容至適量。
細胞培養基:
細胞培養基的配方視實驗需求而定,可以選擇 DMEM、RPMI-1640、MEM 等常用培養基。根據廠家提供的配方,按比例混合培養基粉末與適量的去離子水,並用 pH 調節劑調節 pH 值至適宜範圍,最後用去離子水定容至適量。
標記抗體的配製:
標記抗體通常需要進行稀釋或標記染料。具體的配製方法會根據抗體或染料的性質有所不同。大多數情況下,抗體或染料會附帶說明書,其中包含了建議的稀釋比例和基本的標記方法。根據說明書的建議進行稀釋和標記即可。
細胞溶解液和洗滌緩衝液的配製:
細胞溶解液:
細胞溶解液的配製方法因實驗目的而異。常見的細胞裂解液包括 RIPA 緩衝液、NP-40 緩衝液、細胞裂解液等。可以根據實驗要求和相關文獻提供的方法進行配製。
洗滌緩衝液:
洗滌緩衝液用於洗滌分選後的細胞,以去除殘留的細胞培養基、血清等。常用的洗滌緩衝液是 PBS 或 TBS 緩衝液。也可以根據實驗要求和相關文獻提供的方法進行配製。
緊密聯結試劑配製:
緊密聯結試劑(例如 DAPI)用於染色並識別細胞核。具體的配製方法會根據試劑的性質有所不同,通常會附帶說明書,其中包含了建議的稀釋比例和使用方法。根據說明書的建議進行稀釋即可。