novocib人腺苷激酶說明書

NOVO CIB的人腺苷激酶是一種活性且純化的 345-aa 短形式^(14,2) ADK 蛋白（39kDa）通過 RT-PCR 擴增從(cong) 人肝癌細胞中提取的 mRNA 進行克隆並在大腸杆菌中表達。克隆的 ADK 序列（GenBank 登錄號 U50196）通過 DNA 測序進行確認（ 同一性）。

腺苷激酶是核苷類似物激活的關(guan) 鍵酶。
要快速評估人腺苷激酶新型核苷類似物的底物特性，請參閱我們(men) 的PRECICE ^� ADK 磷酸化檢測試劑盒。

ADK 也是藥物發現的經過驗證的目標：腺苷調節藥物已作為(wei) 新的鎮痛和抗炎藥物 (4) 進行了廣泛測試 (1)，用於(yu) 治療精神分裂症 (7) 或限製缺血性中風後的腦損傷(shang) (8) 。

腺苷激酶是一種普遍存在的酶，可催化 γ-磷酸鹽從(cong) ATP 轉移到腺苷 (AR) 的 5'-羥基，是中樞神經係統功能的重要調節劑，也是參與(yu) 缺氧、炎症和傷(shang) 害感受的信號分子。腺苷激酶與(yu) 腺苷脫氨酶一起調節細胞內(nei) 和細胞外的腺苷濃度。抑製腺苷激酶會(hui) 導致局部腺苷濃度選擇性增加，並降低體(ti) 內(nei) 癲癇發作易感性和傷(shang) 害感受⁽³⁾。 ADK 功能障礙與(yu) 多種病理有關(guan) ，包括糖尿病⁽¹³⁾、癲癇⁽⁶⁾和癌症。因此，ADK 成為(wei) 藥物發現的合理治療靶點，腺苷調節藥物已被廣泛應用。經過測試⁽¹⁾作為(wei) 新的鎮痛和抗炎藥物⁽⁴⁾用於(yu) 治療精神分裂症⁽⁷⁾或限製缺血性中風後的腦損傷(shang) ⁽⁸⁾。
人類ADK的X射線晶體(ti) 結構已得到描述⁽⁹⁾，為(wei) 合理設計和優(you) 化新型ADK抑製劑提供了結構基礎。此外，該酶負責多種治療上有用的核苷的磷酸化和隨後的臨(lin) 床活性，包括抗病藥物利巴韋林⁽¹⁰⁾、免疫抑製藥物咪唑立賓⁽¹¹⁾和抗癌 C-核苷噻唑呋林⁽¹²⁾。

單位定義： 1 個單位的腺苷激酶在 pH 8、37°C 下每分鍾將 1.0 µmole 肌苷和 ATP 轉化為 IMP 和 ADP，由耦合的 IMPDH 酶係統測量。 比活性： ≥ 0.200 單位/毫克蛋白質。 純度：通過12% AA SDS-PAGE控製。

測定條件：腺苷激酶與特定核苷底物的酶活性通過在偶聯的乳酸脫氫酶/丙酮酸激酶係統中的分光光度測定來測量。測定在 37℃、50mM Tris-HCl pH7.6 下進行； 50mM KCl、5mM MgCl 2、2.5mM ATP、0.1mM NADH、1mM 磷酸烯醇丙酮酸、1mM DTT、PK 5U/ml、LDH 5U/ml。在 iEMS Reader MF (Labsystems) 微量滴定板讀數器中在 340 nm 處跟蹤反應。核苷、核苷酸、LDH 和 PK 購自 Sigma-Aldrich。