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血管細胞基礎培養(yang) 基是一種無菌、不含酚紅的液體(ti) 組織培養(yang) 基，旨在用作完整 ATCC 原代細胞解決(jue) 方案係統中的一個(ge) 組件。血管細胞基礎培養(yang) 基旨在支持源自正常人大血管的細胞，例如人臍靜脈內(nei) 皮細胞、主動脈內(nei) 皮細胞或主動脈平滑肌細胞，以及微血管內(nei) 皮細胞。此外，為(wei) 了支持血管係統細胞的增殖和鋪板效率，血管細胞基礎培養(yang) 基必須補充適當的細胞特異性生長試劑盒。
具體(ti) 應用
血管細胞基礎培養(yang) 基是一種無菌、不含酚紅的液體(ti) 組織培養(yang) 基，旨在用作完整 ATCC® Primary Cell Solutions™ 係統的一個(ge) 組件。
該係統旨在支持源自正常人類大血管的細胞，例如人臍靜脈內(nei) 皮細胞、主動脈內(nei) 皮細胞或主動脈平滑肌細胞，以及微血管內(nei) 皮細胞。血管細胞基礎培養(yang) 基含有必需和非必需氨基酸、維生素、其他有機化合物、微量礦物質和無機鹽。為(wei) 了支持血管係統細胞的增殖和鋪板效率，血管細胞基礎培養(yang) 基必須補充適當的細胞特異性生長試劑盒。
該係統旨在支持源自人類心血管係統的細胞，包括以下細胞類型：
源自大血管的內(nei) 皮細胞
微血管內(nei) 皮細胞
源自大血管的平滑肌細胞
源自心髒的肌肉細胞
該係統旨在支持源自正常人類大血管的細胞，例如人臍靜脈內(nei) 皮細胞、主動脈內(nei) 皮細胞或主動脈平滑肌細胞，以及微血管內(nei) 皮細胞。血管細胞基礎培養(yang) 基含有必需和非必需氨基酸、維生素、其他有機化合物、微量礦物質和無機鹽。為(wei) 了支持血管係統細胞的增殖和鋪板效率，血管細胞基礎培養(yang) 基必須補充適當的細胞特異性生長試劑盒。
原代心肌細胞；正常，人類，ATCC PCS-120-010
原代主動脈平滑肌細胞；正常，人類，ATCC PCS-100-012
原發性冠狀動脈平滑肌細胞；正常，人類，ATCC PCS-100-021
原發性肺動脈平滑肌細胞；正常，人類，ATCC PCS-100-023
原代真皮微血管內(nei) 皮細胞；正常、人類、新生兒(er) 、ATCC PCS-110-010
原代臍靜脈內(nei) 皮細胞；正常，人類，ATCC PCS-100-010
原代臍靜脈內(nei) 皮細胞；正常，人類，混合，ATCC PCS-100-013
原代主動脈內(nei) 皮細胞；正常，人類，ATCC PCS-100-011
原代冠狀動脈內(nei) 皮細胞；正常，人類，ATCC PCS-100-020
原代肺動脈內(nei) 皮細胞；正常，人類，ATCC PCS-100-022
慶大黴素-兩(liang) 性黴素 B 溶液 (ATCC PCS-999-025)
青黴素-鏈黴素-兩(liang) 性黴素 B 溶液 ( ATCC PCS-999-002 )
酚紅 ( ATCC PCS-999-001 )
微血管內(nei) 皮細胞生長試劑盒-BBE ( ATCC PCS-110-040 )
微血管內(nei) 皮細胞生長試劑盒-VEGF ( ATCC PCS-110-041 )
內(nei) 皮細胞生長試劑盒-BBE ( ATCC PCS-100-040 )
內(nei) 皮細胞生長試劑盒-VEGF ( ATCC PCS-100-041 )
對於(yu) 源自大血管的內(nei) 皮細胞（例如，正常原代人臍靜脈內(nei) 皮細胞 (HUVEC)、ATCC PCS-100-010、原代臍靜脈內(nei) 皮細胞；正常、人、混合、ATCC PCS-100-013、原代主動脈內(nei) 皮細胞Cells，ATCC PCS-100-011），用以下試劑盒之一補充血管細胞基礎培養(yang) 基：
對於(yu) 源自正常人體(ti) 組織的微血管內(nei) 皮細胞（例如，原代真皮微血管內(nei) 皮細胞；正常、人類、新生兒(er) 、ATCC PCS-110-010），用以下試劑盒之一補充血管細胞基礎培養(yang) 基：
對於(yu) 源自大血管的平滑肌細胞（例如，原代主動脈平滑肌細胞，ATCC PCS-100-012），用血管平滑肌細胞生長試劑盒（ATCC PCS-100-042）補充血管細胞基礎培養(yang) 基。
可選媒體(ti) 補充：
處理程序
完整生長培養(yang) 基的製備
表 1.如果使用內(nei) 皮細胞生長試劑盒-BBE (ATCC ® PCS-100-040)，請添加每種成分的一定體(ti) 積：
成分 | 體(ti) 積 | 最終濃度 |
牛腦提取物 (BBE) | 1.0毫升 | 0.2% |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
L-穀氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
硫酸肝素 | 0.5毫升 | 0.75 單位/毫升 |
氫化可de鬆半琥珀酸酯 | 0.5毫升 | 1微克/毫升 |
胎牛血清 | 10.0毫升 | 2% |
| 抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
表 2 . 如果使用內(nei) 皮細胞生長試劑盒-VEGF (ATCC ® PCS-100-041)，請添加每個(ge) 成分的一定體(ti) 積：
成分 | 體(ti) 積 | 最終濃度 |
重組人VEGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
rh FGF 堿性 | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人IGF-1 | 0.5毫升 | 15納克/毫升 |
L-穀氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
硫酸肝素 | 0.5毫升 | 0.75 單位/毫升 |
氫化可de鬆半琥珀酸酯 | 0.5毫升 | 1微克/毫升 |
胎牛血清 | 10.0毫升 | 2% |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
表 3 . 如果使用血管平滑肌生長試劑盒 (ATCC ® PCS-100-042)，請添加每個(ge) 組件的一定體(ti) 積：
成分 | 體(ti) 積 | 最終濃度 |
rh FGF-堿性 | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人胰島素 | 0.5毫升 | 5微克/毫升 |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
L-穀氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
胎牛血清 | 25.0毫升 | 5% |
表 4.如果使用微血管內(nei) 皮細胞生長試劑盒-BBE (ATCC ® PCS-110-040)，請添加每種成分的一定體(ti) 積：
成分 | 體(ti) 積 | 最終濃度 |
牛腦提取物 (BBE) | 1.0毫升 | 0.2% |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
L-穀氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
硫酸肝素 | 0.5毫升 | 0.75 單位/毫升 |
氫化可de鬆半琥珀酸酯 | 0.5毫升 | 1微克/毫升 |
胎牛血清 | 25.0毫升 | 5% |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
表 5 . 如果使用微血管內(nei) 皮細胞生長試劑盒-VEGF (ATCC ® PCS-110-041)，請添加每種成分的一定體(ti) 積：
成分 | 體(ti) 積 | 最終濃度 |
重組人VEGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
rh FGF 堿性 | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人IGF-1 | 0.5毫升 | 15納克/毫升 |
L-穀氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
硫酸肝素 | 0.5毫升 | 0.75 單位/毫升 |
氫化可de鬆半琥珀酸酯 | 0.5毫升 | 1微克/毫升 |
胎牛血清 | 25.0毫升 | 5% |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
表 6.如果使用心肌細胞生長試劑盒 (ATCC ® PCS-120-040)，請添加每種成分的一定體(ti) 積：
成分 | 體(ti) 積 | 最終濃度 |
L-穀氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
胎牛血清 | 25.0毫升 | 5% |
胎球蛋白 | 5.0毫升 | 25毫克/毫升 |
重組人FGF-b | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人胰島素 | 0.5毫升 | 5毫克/毫升 |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
重組人EGF/TGF-b1 | 0.5毫升 | 5 納克/毫升，30 皮克/毫升 |
增殖不需要抗菌劑和酚紅，但如果需要可以添加。表 7 總結了添加到完整生長培養(yang) 基中的每種可選組分的建議體(ti) 積。
從(cong) 冰箱中取出一套生長套件；確保所有組件的蓋子均已擰緊。
在將生長套件的組件添加到基礎培養(yang) 基中之前將其解凍。在添加到基礎培養(yang) 基之前，需要在 37°C 水浴中加熱 L-穀氨酰胺組分並搖動以溶解任何沉澱物。
從(cong) 冷藏處獲取一瓶血管細胞基礎培養(yang) 基 (475 mL)。
用 70% 乙醇噴灑所有生長套件組件小瓶和基礎培養(yang) 基瓶的外表麵，以淨化它們(men) 。
使用無菌技術並在層流罩或生物安全櫃中工作，使用單獨的無菌移液器將表 1、2、3、4 或 5 中所示的每個(ge) 生長套件組件的體(ti) 積轉移到基礎培養(yang) 基瓶中轉移。
表 7.添加抗菌劑/抗真菌劑和酚紅（可選）
成分 | 體(ti) 積 | 最終濃度 |
慶大黴素-兩(liang) 性黴素B溶液 | 0.5毫升 | 慶大黴素：10 µg/mL 兩(liang) 性黴素 B：0.25 µg/mL |
青黴素-鏈黴素-兩(liang) 性黴素B溶液 | 0.5毫升 | 青黴素：10 單位/mL 鏈黴素：10 µg/mL 兩(liang) 性黴素 B：25 ng/mL |
酚紅 | 0.5毫升 | 33微米 |
蓋緊生長培養(yang) 基的瓶子並輕輕旋轉內(nei) 容物以確保溶液均勻。請勿用力搖晃，以免產(chan) 生泡沫。給瓶子貼上標簽並注明日期。
完整的生長培養(yang) 基應在 2°C 至 8°C 的黑暗條件下保存（不要冷凍）。在這些條件下儲(chu) 存時，完整培養(yang) 基可穩定保存 30 天。
冷凍保存
1. 檢查所有容器是否有泄漏或破損。
2. 將基礎培養(yang) 基保存在 2°C 至 8°C 下。不要凍結。避光。使用前加熱介質時，溫度不要超過 37°C。當在 2°C 至 8°C 的黑暗中儲(chu) 存時，產(chan) 品在標簽上的有效期內(nei) 保持穩定。
細菌和真菌測試:沒有檢測到
支原體(ti) 汙染:沒有檢測到
內(nei) 毒素:< 0.5 EU/毫升
滲透壓:270±10毫滲透壓/千克
酸堿度:7.8±0.3
功能測試:增殖率和形態
本產(chan) 品僅(jin) 供實驗室研究使用。它不適用於(yu) 任何動物或人類治療用途、任何人類或動物消費或任何診斷用途。
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