如何為 ELISA 試劑盒準備條件培養基樣品

如何準備條件培養(yang) 基樣品

我們(men) 建議準備無血清或低血清培養(yang) 基樣品，因為(wei) 血清往往含有可能產(chan) 生顯著背景信號的細胞因子。如果需要測試含有血清的培養(yang) 基，我們(men) 建議還運行未培養(yang) 的培養(yang) 基空白來評估基線信號。然後可以從(cong) 培養(yang) 基樣本數據中減去該基線。

• 第 0 天，在含有完quan培養(yang) 基的 100 mm 組織培養(yang) 板中接種約 100 萬(wan) 個(ge) 細胞。*

• 第3天，除去培養(yang) 基並用6-8ml無血清或低血清培養(yang) 基（例如含有0.2%小牛血清的培養(yang) 基）替換培養(yang) 基。

• 第 5 天，將培養(yang) 基收集到 15 ml 管中。在 4℃ 的離心機中以 2,000 rpm 的速度離心 10 分鍾。保存上清液。將上清液轉移至 1.5 ml Eppendorf 管中。將上清液儲(chu) 存在-80°C 直至實驗。大多數樣品可以通過這種方式保存至少一年。

*最佳接種細胞數量因細胞類型而異，可能需要憑經驗確定。

注意：如果需要進行後續實驗，強烈建議在製備後對所有樣品進行分裝，大程度地減少多次凍融循環導致的細胞因子降解。

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