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此外，已經開發了人類和猴子“ELISPOT"試劑盒，用於(yu) 使用熒光標記抗體(ti) （所謂的 氟斑).
ELISPOT檢測是需要監測的靈敏的檢測方法之一 離體(ti) 單細胞水平的細胞免疫反應。該測定可以準確檢測T細胞響應抗原釋放的分泌蛋白，例如細胞因子。測試中使用的細胞懸浮液可以來自血液（PBMC），淋巴，脾髒，骨髓或CNS組織。
經典的 T 細胞監測試驗（例如混合淋巴細胞反應 [MLR] 和細胞毒性 T 淋巴細胞 [CTL] 試驗）測量 CD4 +或 CD8 + T 細胞介導的免疫反應。 MLR 和 CTL 檢測都有其缺點，包括使用放射性、低通量篩選、低溫保存標本的靈敏度降低和技術負擔。也可以使用 RT-PCR 分析來測量 T 細胞反應。然而，該測定檢測的是 mRNA 而不是分泌的蛋白質。
ELISPOT 檢測沒有這些缺點，已證明比 ELISA 或細胞內(nei) 細胞因子染色更靈敏。1-3 高靈敏度是由於(yu) 板結合抗體(ti) 在細胞釋放的分泌蛋白在細胞培養(yang) 基中稀釋、與(yu) 細胞表麵受體(ti) 相互作用或被蛋白酶降解之前直接捕獲細胞釋放的分泌蛋白。這一特性允許檢測極低頻率的細胞因子分泌細胞 (1/100,000)，並且還提供了高通量篩選的可能性。
ELISPOT 檢測已被證明是一種靈敏的係統，可用於(yu) 監測人類個(ge) 體(ti) 或動物的疾病進展。多項研究表明，身體(ti) 不同部位產(chan) 生細胞因子的細胞頻率的變化充分反映了免疫功能的變化。4個(ge)
ELISPOT 檢測可能有助於(yu) 了解新病毒引起疾病的情況下疾病的發展，以及早期疫苗開發研究，
ELISPOT 測定可用於(yu) 分析 T 細胞反應以預測同種異體(ti) 移植排斥反應。7
ELISPOT測定可用於(yu) 確定接種疫苗的非人靈長類動物PBMC中抗原特異性T細胞反應的頻率8,9 和免疫大鼠的脾髒細胞10 和老鼠11.
ELISPOT測定可能有助於(yu) 更好地了解病原體(ti) 如何逃避保護性免疫。12
ELISPOT測定已用於(yu) 旨在誘導腫瘤特異性T細胞的疫苗接種試驗過程中。13,14
將細胞在塗有高親(qin) 和力單克隆抗體(ti) 的ELISPOT板的孔中孵育特定時間，孵育期間產(chan) 生的細胞因子與(yu) 該抗體(ti) 結合。隨後，細胞被洗掉。用生物素化的抗細胞因子檢測抗體(ti) 和酶標記的鏈黴親(qin) 和素的組合來檢測包被抗體(ti) 捕獲細胞因子的區域。測定的最後一步是添加底物，產(chan) 生一個(ge) 彩色區域（“斑點"），揭示細胞因子分泌的部位。
T細胞ELISPOT程序的不同步驟在 T細胞ELISPOT檢測流程圖.
這是人類PBMC中T細胞產(chan) 生的IFN-γ和IL-2特異性斑點的一個(ge) 例子。
該人肌內(nei) 注射了 病毒 mRNA 疫苗（加強疫苗接種）。用SARS-CoV-2肽庫刺激疫苗接種前後的PBMC，並在ELISPOT平板上孵育24小時（2x105 細胞/孔）
人類ELISPOT產(chan) 品
猴子ELISPOT產(chan) 品
猴ELISPOT產(chan) 品
鼠 ELISPOT 產(chan) 品
大鼠ELISPOT產(chan) 品
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