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幹細胞的轉染

更新時間:2023-06-02      點擊次數:694

很多時候,進行細胞轉染的研究人員必須進行謹慎的平衡。實現足夠高的轉染水平以提供可靠的結果,同時又不在此過程中殺死太多細胞,是一項持續的鬥爭(zheng) 。對於(yu) 從(cong) 事幹細胞研究的科學家來說,這些問題更具挑戰性,因為(wei) 它們(men) 的轉染率曆來較低(通常低於(yu) 5%)。 

許多科學家現在正在尋求利用幹細胞進行基於(yu) CRISPR的基因編輯,以在細胞水平上對疾病產(chan) 生新的理解。有一種高效可靠的方法來轉染幹細胞,以實現基因組編輯的新發現,這一點從(cong) 未如此重要。現在非常需要針對CRISPR應用優(you) 化幹細胞轉染方案。允許幹細胞維持其多能狀態並最大限度地減少轉染的細胞毒性的方案至關(guan) 重要。

我們(men) 的支鏈兩(liang) 親(qin) 性肽膠囊(BAPC™)克服了脂質體(ti) 載體(ti) 的問題,有助於(yu) 最大限度地減少轉染幹細胞的壓力。這與(yu) 誘導多能幹細胞(iPSCs)尤其相關(guan) ,它們(men) 對環境變化非常敏感,對壓力反應不佳。

將熒光激活細胞分選 (FACS) 分選的幹細胞(輻射敏感細胞)培養(yang) 6 小時,並與(yu) BAPC 和 Atto 633 一起孵育過夜。然後用固定在 4% FFA 中的培養(yang) 基洗滌細胞兩(liang) 次。 DMSO 處理的細胞用作陰性對照。在上圖中,比例尺代表 10 微米,白色箭頭代表 BAPC 陽性細胞。

Phoreus™ BAPtofect™-25 細胞轉染試劑盒最大限度地減少了幹細胞轉染的壓力。由於(yu) BAPC 是由合成的、天然存在的肽構成的,它們(men) 是自組裝的、水溶性的、對細胞無毒,並且不會(hui) 觸發免疫係統反應。

Phoreus目前正在與(yu) 行業(ye) 合作夥(huo) 伴合作開發iPSC幹細胞轉染的新方案。 雖然這項初步工作已經成功地證明了幹細胞對染色BAPC的有效吸收,但目前正在進行研究,以證明核酸的保護遞送導致幹細胞成功轉化。這些新協議將促進CRISPR Cas-9的遞送,並指導RNA用於(yu) 幹細胞中的基因編輯,從(cong) 而在細胞水平上對疾病產(chan) 生令人興(xing) 奮的新理解。

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