如何測量LOD，以及我們如何實現熒光素的皮摩爾檢測

確定檢測限

檢測限（LOD）定義(yi) 為(wei) 低濃度分析物的存在或不存在可以是使用給定的分析方法確定。樣本產(chan) 生的信號（綠線）必須通過舒適的裕度（藍線），以便確信分析物

真正被檢測到。檢測限（LOD）通常為(wei) 定義(yi) 為(wei) 信號的樣本濃度等於(yu) 噪聲水平的3倍並且受到係統噪聲的限製。

測量熒光素

從(cong) 5nM到5pM的一係列熒光素稀釋液使用0.1NaOH溶液製備，並在10mm內(nei) 測量路徑長度石英比色杯。熒光測量結果.使用WP VIS光譜儀(yi) ，50μm狹縫，使用450 nm.用於(yu) 激勵的LED。我們(men) 自己的快速反應杯支架已連接光譜儀(yi) 的自由空間訪問光譜儀(yi) 的全f/2.0視野，最大限度地收集光線。熒光素對於(yu) 低至5pM的樣品，在積分時間僅(jin) 為(wei) 50ms，平均值為(wei) 50x。

噪聲的重要性

光譜儀(yi) 測量中的噪聲可能包括熱噪聲.噪聲（暗噪聲，當探測器未照明時），發射噪聲（計數噪聲，由光子的概率引起產(chan) 生電流）、讀出噪聲（由於(yu) 檢測器電路），以及固定模式噪聲（取決(jue) 於(yu) 二極管陣列）。雜散光也可能導致噪聲，並且應該將其最小化。這個(ge) 我們(men) 50個(ge) 空白測量的標準偏差（stddev）0.1 M NaOH參考值的波長，並且發現非常低：4到7個(ge) 計數。

通過設計最大限度地減少雜散光

雜散光是導致LOD降低的一個(ge) 關(guan) 鍵因素。那是為(wei) 什麽(me) 我們(men) 放置一個(ge) 我們(men) 自己的匹配位於(yu) 每個(ge) 光柵中心的體(ti) 相全息（VPH）光柵光譜儀(yi) ，使用透射設計和像差校正光學器件，以保持光學器件中的每一個(ge) 可能的光子路徑我們(men) 的VPH光柵提供高達40%的效率，具有更均勻的波長和偏振響應，以及與(yu) 反射光柵相比具有超低散射，增強了我們(men) 穩健、熱穩定性設計的性能。

檢測和定量限度

作為(wei) 濃度函數的信噪比為(wei) 熒光素峰繪製，取信號（“樣本"-“空白"）與(yu) 空白的在ln-ln尺度上繪製這一點揭示了高度線性擬合，指示高質量數據。外推到SNR=3，即極限我們(men) 係統的檢測限（LOD）僅(jin) 為(wei) 2pM！

定量限（LOQ）定義(yi) 了兩(liang) 個(ge) 可以說樣品的濃度不同，需要SNR=10。我們(men) 的係統的LOQ被發現是6.6pM。

結論

LOD和LOQ是相當簡單的測量方法，可以實現緊湊型光譜儀(yi) 的性能.以便直接與(yu) 更靈敏的台式係統進行比較。實現約2pM LOD，WP可見光熒光.該係統證明其自身足夠靈敏，可以與(yu) 昂貴的台式熒光計的典型0.5pM LOD相媲美。它靈敏、緊湊、快速，是集成到生物醫學儀(yi) 器或現場的理想工具。