親和純化樹脂和方法

親(qin) 和純化（也稱為(wei) 親(qin) 和色譜）被認為(wei) 是強大的方法 純化色譜 或從(cong) 複雜的混合物（如粗細胞裂解物、細胞培養(yang) 上清液或其他樣品）中富集感興(xing) 趣的蛋白質。 

雖然選擇性沉澱可能在某種程度上有助於(yu) 分離不同類型的大分子，但大多數純化方法依賴於(yu) 溶液中分子與(yu) 固體(ti) 、固定材料的物理或化學相互作用的差異來達到預期的結果。 

例如，在親(qin) 和純化中，通過用與(yu) 所需分子特異性結合的化學固定配體(ti) 處理固體(ti) 載體(ti) ，將目標分子與(yu) 溶液中的其他組分分離。因此，當複雜的混合物通過色譜柱時，目標分子與(yu) 配體(ti) 結合，而溶液中的非結合組分則簡單地用適當的緩衝(chong) 液衝(chong) 洗掉。 

最後，改變緩衝(chong) 條件以破壞配體(ti) 和目標分子之間的結合相互作用，並在此過程中洗脫高度純化的目標分子。

親(qin) 和純化功能非常強大，因為(wei) 通過親(qin) 和柱一次，可以將樣品純化一千倍以上。

親(qin) 和純化的堅實支撐

基本上，親(qin) 和色譜中使用兩(liang) 種類型的固體(ti) 載體(ti) ：多孔凝膠載體(ti) 或樹脂和磁珠。但是，在本文中，我們(men) 將主要關(guan) 注親(qin) 和純化樹脂。

樹脂或凝膠載體(ti) 通常是基於(yu) 糖或丙烯酰胺的聚合物樹脂，在溶液中產(chan) 生 直徑50-150μm的珠子。除了極其多孔之外，珠子還足夠大，允許生物分子在磁珠表麵周圍以及通過和在珠子之間暢通無阻地移動。此外，串珠形式也使實驗室的工作更容易、更方便，因為(wei) 它們(men) 可以很容易地分配以包裝任何尺寸的色譜柱。

此外，由於(yu) 配體(ti) 共價(jia) 連接到珠狀聚合物的外表麵和內(nei) 表麵，因此允許樣品分子自由流動通過固定配體(ti) 的高表麵積。

目前，大多數實驗室使用交聯珠狀瓊脂糖進行蛋白質親(qin) 和純化，因為(wei) 它是重力流、低壓程序和低速離心的理想選擇。珠狀瓊脂糖樹脂也可以進行額外的交聯和化學硬化，以提高其承受高壓的能力，但要預先警告，這會(hui) 顯著降低結合能力。

該基質通常具有4%（CL-4B）和6%（CL-6B）密度，均具有培養(yang) 基偶聯能力，適用於(yu) 相同的應用（蛋白質印跡、高通量篩選、相互作用研究、突變分析、功能測定、結構分析）。磁珠的尺寸通常在 45 至 165 μm 之間，它們(men) 都具有 0.35 MPa 的壓力限製。它們(men) 僅(jin) 在排除限製方麵有所不同（CL-4B 為(wei) 20，000 kDa，CL-6B 為(wei) 4，000 kDa）。

除瓊脂糖凝膠外，聚丙烯酰胺基樹脂也可用於(yu) 柱親(qin) 和色譜。雖然這兩(liang) 種介質都具有較低的非特異性結合特性，但聚丙烯酰胺基樹脂不易壓縮，可以承受中壓應用。

G-Biosesciences 提供廣泛的親(qin) 和純化試劑盒和樹脂，以適應各種應用。這裏有一些 例子 這可以幫助您解決(jue) 親(qin) 和純化挑戰。  

• 用於(yu) 親(qin) 和素-鏈黴親(qin) 和素和中性粒蛋白純化的固定化生物素和亞(ya) 胺生物素樹脂

• 鈣調蛋白樹脂用於(yu) 純化鈣調蛋白結合蛋白 （CBP）

• 固定化對氨基苯基磷酸膽堿和更具成本效益的固定化O-磷酸乙醇胺用於(yu) C反應蛋白純化

• GST 標記或 His 標記的蛋白質純化試劑盒或樹脂

• 固定化肝素和凝集素，用於(yu) 分離脂蛋白、生長激素、止血蛋白和其他生理標誌物

• 硫丙基樹脂 用於(yu) 純化含蛋白質的硫醇基團。

G-Biosesciences提供含大量用於(yu) 純化蛋白質、核酸和其他生物分子的樹脂和磁珠。 幾種樹脂通常用於(yu) 在純化過程中去除幹擾劑。 該手冊(ce) 首先介紹了預活化的樹脂，以便研究人員可以通過各種基團偶聯蛋白質和其他生物分子。接下來的部分是用於(yu) 純化特定標簽和基序的樹脂，包括6X組氨酸、生物素等。 主要色譜樹脂包括用於(yu) 離子交換色譜和體(ti) 積排阻色譜的樹脂。 最後，大量樹脂旨在去除常見的有問題的化學物質和生物分子，包括洗滌劑、內(nei) 毒素等。

《純化樹脂手冊(ce) 》包括以下部分：

• 親(qin) 和純化樹脂
  

• 用於(yu) 偶聯巰基、胺、羧基、碳水化合物和活性氫的預活化樹脂

• 親(qin) 和素和鏈黴親(qin) 和素純化樹脂
  

• 固定化生物素和低親(qin) 和力的伊尼博汀

• 用於(yu) 純化生物素和生物素標記分子的樹脂

• 固定化親(qin) 和素和單體(ti) 親(qin) 和素以及低親(qin) 和力鏈黴親(qin) 和素

• 用於(yu) CBP標簽的鈣調蛋白樹脂

• C-反應蛋白純化樹脂

• GST標記的蛋白質純化

• 用於(yu) 酵母和細菌重組蛋白的穀胱甘肽樹脂和蛋白質純化試劑盒

• 組氨酸標記蛋白純化

• IDA 和 NTA 樹脂、色譜柱、板和磁珠

• 提供鎳、鈷、銅和鋅版本

• 固定化肝素

• 用於(yu) 碳水化合物分離的固定化凝集素

• 凝集素純化樹脂

• 核酸純化樹脂

• 固定化硼酸和二氧化矽磁珠

• 蛋白酶純化樹脂

• 抗體(ti) 純化樹脂

• 蛋白 A、蛋白 G 和蛋白 A/G 樹脂和色譜柱

• IgA純化樹脂

• 親(qin) 硫吸附

• 凝膠過濾/體(ti) 積排阻色譜

• 疏水作用色譜

• 離子交換色譜

• 陰陽離子交換器

• 除汙樹脂

• 去汙樹脂

• 內(nei) 毒素去除樹脂

• 脫鹽和緩衝(chong) 液交換離心柱

• 還原劑樹脂，包括TCEP

• 去除白蛋白

• 多種一次性色譜柱可供選擇