不同轉染試劑的原理有哪些

　　細胞轉染是指將外源基因如DNA，RNA等導入細胞內的技術。隨著分子生物學的發展，轉染已經成為研究和控製細胞基因功能、實現基因調控的常規工具。市場上各種轉染試劑琳琅滿目，各有千秋，然而沒有任何一種轉染試劑可以能夠適用於所有細胞種類、滿足所有實驗需求和目的，成分控認為轉染試劑的成分及作用機理對轉染效果及細胞生理作用影響顯著，是轉染試劑選擇的重要依據，選試劑時要留意成分。

　　嚴格來講，轉染的方法可以基於化學法、物理法(電穿孔、顯微注射等)以及病毒介導法，沒有一種方法是放之四海而皆準。作為成分控的小編，本次主要為大家介紹基於各類轉染試劑的化學法轉染。

　　基於磷酸鈣成分的轉染試劑，其主要作用原理是與DNA通過沉澱反應形成磷酸鈣-DNA複合物，粘附到細胞膜表麵，借助內吞作用進入細胞質。pH值，鈣離子濃度，DNA濃度，沉澱時間，細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結果產生影響，因此實驗條件摸索和優化時間較長，且重複性不佳。

　　基於脂質體的轉染試劑包括中性脂質體和陽離子脂質體兩種。中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA，借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。目前應用比較廣泛的是帶正電的陽離子脂質體轉染試劑，DNA並沒有預先包埋在脂質體中，而是帶負電 的DNA自動結合到帶正電的脂質體上，形成DNA-陽離子脂質體複合物，從而吸附到帶負電的細胞膜表麵，經過內吞被導入細胞。此方法操作簡單，重複性好，在體外轉染中有很高的效率，但具有一定的細胞毒性，可能會幹擾細胞的代謝。且活性受血清影響，需要去除血清。

　　基於陽離子聚合物的轉染試劑，帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的複合物後與細胞表麵帶負電的蛋白多糖相互作用，並通過內吞作用進入細胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類，前者細胞毒性相對較大，後者細胞毒性較小，但其轉染效率都高於脂質體轉染，適用也較為廣範。

　　以上單一成分的轉染試劑或聚焦於提高效率或著重於降低細胞毒性，可謂魚和熊掌不可兼得也。